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不可思議!雞新城疫病毒檢測試劑盒操作起來超簡單
【產(chǎn)品簡介】
雞新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。本病主要特征是呼吸困難、嚴(yán)重下痢、粘膜和漿膜出血,病程稍長的伴有神經(jīng)癥狀,給養(yǎng)雞業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。在雞新城疫的免疫預(yù)防工作中,接種了雞新城疫疫苗后,由于多種因素可能導(dǎo)致雞不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平NDV抗體。
本試劑盒采用新城疫病毒經(jīng)滅活、純化、濃縮制成的抗原作為固相抗原包被微孔板,用于檢測血清中抗ND病毒IgG抗體。檢測結(jié)果可以用于免疫新城疫疫苗后的抗體動態(tài)水平監(jiān)測,指導(dǎo)免疫預(yù)防工作,評估雞場新城疫免疫狀況,也可用于雞新城疫的流行病學(xué)調(diào)查及臨床輔助診斷依據(jù)。
【用法與判定】
1、需要自備的器材
1.1微量移液器;
1.2 微量移液器配套使用的槍頭;
1.3 用來稀釋洗滌液的500ml量筒;
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標(biāo)儀;
1.5 用于稀釋樣品的1.5ml Ep管;
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行40倍稀釋(建議:5μl血清樣品加入195μl樣品稀釋液中),樣品加入包被板前要充分混勻,稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意:①制備血清用的血液樣本應(yīng)無溶血現(xiàn)象發(fā)生;②不能稀釋陰性、陽性對照。
3、操作步驟 (﹡使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻,所有試劑應(yīng)恢復(fù)至室溫)
3.1 在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對照;
3.2 在A3和A4孔中分別加入100μl陽性對照;
3.3 取100μl經(jīng)1:40稀釋好的待檢樣品加入相應(yīng)孔中,并做好記錄;
3.4 37℃孵育1h;
3.5 將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結(jié)晶,需先溶解后,方可進(jìn)行稀釋)進(jìn)行洗板,重復(fù)5次,每次30s;
﹡加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結(jié)果,盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩干凈;
3.6 每孔加100μl酶標(biāo)結(jié)合物;
3.7 37℃孵育1h;重復(fù)步驟3.5;
3.8 每孔加100μl底物液;
3.9 37℃孵育10min(避光顯色);
3.10 每孔加100μl的終止液;
3.11 立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值,即OD450值。
【注意事項】
(1)待檢血清樣品數(shù)量過多時,應(yīng)先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后,再統(tǒng)一將血清樣品加入酶標(biāo)板中,使反應(yīng)時間一致。
(2)試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。
(3)底物液和終止液對皮膚有刺激性,注意防護(hù)。
(4)底物液不要暴露于強(qiáng)光和任何氧化劑;使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
(5)所有試劑應(yīng)在2~8℃存放;使用前恢復(fù)到室溫,使用后放回2~8℃。
(6)注意防止試劑盒組分受到污染。
(7)不要使用超過有效期的試劑,不同批次試劑盒的組分不要混用。
(8)操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。
不可思議!雞新城疫病毒檢測試劑盒操作起來超簡單
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