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蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒

描述:測定意義
蛋白質(zhì)羰基是多種氨基酸在蛋白質(zhì)的氧化修飾過程中的早期標(biāo)志,其含量高低表明蛋白質(zhì)氧化損傷程度的大小,是衡量蛋白質(zhì)氧化損傷的主要指標(biāo)。
測定原理
羰基與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成紅色2,4-二硝基苯腙,在370nm處有特征吸收峰。
蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2019-11-07
  • 訪問量:430
產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題:蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒

自備實驗用品及儀器

天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、漩渦震蕩儀、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿和蒸餾水,無水乙醇,乙酸乙酯。

試劑組成和配制

提取液:液體50mL×1瓶,4保存。

試劑一:粉劑0.1g×5支,4避光保存。(使用前根據(jù)樣品數(shù),每支加1mL水溶解,每支為10個樣品用量)

試劑二:液體20mL×1瓶,4避光保存。

試劑三:液體20mL×1瓶,4保存。

試劑四:液體25mL×1瓶,4保存。

試劑五:根據(jù)測定樣品量,將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。

試劑六:液體100mL×1瓶,4保存。

樣品處理

組織樣品:稱取約0.1g組織樣品,加入1mL提取液,充分勻漿后于45000rpm離心10min,取上清,加入0.1mL試劑一,室溫放置10min,412000rpm離心10min,取上清,然后取20μL測定蛋白含量,剩余的作為待測樣品。

測定步驟和操作表

 

空白管

測定管

樣品(mL

0.2

0.2

試劑二(mL

 

0.4

試劑三(mL

0.4

 

混勻,37避光反應(yīng)1h

試劑四(mL

0.5

0.5

靜置5min,4,12000rpm離心15min,棄上清,留沉淀

試劑五(mL

1.0

1.0

漩渦混勻,4,12000rpm離心10min,棄上清,留沉淀

試劑五(mL

1.0

1.0

漩渦混勻,412000rpm離心10min,棄上清,留沉淀

試劑五(mL

1.0

1.0

漩渦混勻,412000rpm離心10min,棄上清,留沉淀

試劑六(mL

1.0

1.0

漩渦混勻,37溫育15min,沉淀全部溶解后,4,12000rpm離心15min,取上清,1mL石英比色皿,試劑六調(diào)零,測定OD370

計算公式

蛋白質(zhì)羰基含量(μmol/mg prot= 227.27×OD370測定管OD370測定管÷樣品蛋白質(zhì)濃度注意事項:

1. 試劑一使用之前根據(jù)要測定的樣品數(shù)現(xiàn)配,配置好后4℃保存,若變?yōu)楹谏?,則不能使用。

2. 試劑二見光易分解,反應(yīng)需嚴(yán)格避光。

 

蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒

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