標(biāo)題：γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性檢測(cè)試劑盒

測(cè)定意義：

γ-GT是γ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶，催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨?；D(zhuǎn)移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨?；衔锏乃?，產(chǎn)生谷氨酸鹽，在細(xì)胞外谷胱甘肽新陳代謝中起了重要的作用。

自備儀器和用品：

低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體×1瓶，4℃保存。

試劑四：液體×1瓶，4℃保存。

工作液（在試劑二瓶中配制）：臨用前配制，把試劑三倒入試劑二瓶中，充分溶解（室溫過低時(shí)可以40℃水浴促進(jìn)溶解）；然后把試劑四倒入試劑二瓶中，混勻后室溫保存。

粗酶液提?。?/span>

稱取約0.1g樣品，加試劑一1 mL充分研磨，于4℃，10000rpm離心15min，取上清液待測(cè)。

γ-GT測(cè)定操作

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到405 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二置于25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動(dòng)物）水浴中預(yù)熱30min以上（保證無沉淀）。

3. 測(cè)定管：取微量玻璃比色皿或96孔板，依次加入20μL上清液，180μL工作液，混勻后于405nm測(cè)定10s和70s時(shí)吸光度，記為A1和A2。

回歸方程：

分別配制濃度為0、20、40、60、80、100μmol/L的對(duì)硝基苯胺溶液，于405nm比色，記錄其吸光值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得標(biāo)準(zhǔn)曲線公式為：y=0.006x+0.0016，x為對(duì)硝基苯胺濃度，y為吸光值，R²=0.999。

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性檢測(cè)試劑盒