標(biāo)題：β-葡萄糖苷酶（β-GC）檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

β-葡萄糖苷酶(β-GC)檢測試劑盒

測定意義：                          

β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化β-糖苷鍵水解，具有多方面生理作用：在纖維素的糖化作用中，β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體，使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味；β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷，釋放HCN，從而防止昆蟲取食。

測定原理：

β-GC分解對-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計(jì)算β-GC活性。

自備用品：

可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入10mL雙蒸水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。

試劑二：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每400萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），15000g，4℃，離心20min，取上清，置冰上待測。

2、組織的處理：稱取約0.2g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心20min，取上清，置冰上待測。

測定步驟和加樣表：

迅速混勻，放入37℃準(zhǔn)確水浴30min后，立即放入沸水浴中煮沸5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻（以保證濃度不變）

充分混勻，8000g，4℃，離心5min，取上清液

充分混勻，室溫靜置2min后，用對照管調(diào)零，400nm處測定吸光值A

β-葡萄糖苷酶(β-GC)檢測試劑盒