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肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)試劑現(xiàn)貨秒發(fā)
標(biāo)本準(zhǔn)備:血清,靜脈血3ml不抗凝。
原理:用已知傷寒沙門菌菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原及甲、乙、丙3種副傷寒沙門菌鞭毛抗原的診斷菌液,與被檢血清作細(xì)菌凝集反應(yīng)。若被檢血清中有抗體存在,可與相應(yīng)抗原起反應(yīng),出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象為陽性。
試劑:診斷菌液有傷寒O、H及副傷寒A、B、C,共5種。
使用時(shí)用生理鹽水稀釋成每毫升含7~10億(7*108~1*109)個(gè)菌的懸液備用。
檢測(cè)步驟:
1.取lOmm×lOOmm試管5排,每排8支。
2.另取15mm×lOOmm試管1支,加生理鹽水4.75m1及患者血清0.25ml混合,成為1:20稀釋血清。
3.每排第l管內(nèi)各加1:20稀釋血清0.5ml。
4.在剩余的2.5ml稀釋血清(1:20)中加人生理鹽水2.5ml,成為1:40稀釋血清。
5.再取1:40的血清,分別加入每排第2管中,每管0.5ml。在剩余的2.5ml稀釋血清(1:40)中,加入生理鹽水2.5ml,成為1:80稀釋,再加入每排第3管中,每管0.5ml,如此操作,直至加完每排第7管為止。
6.每排zui后1管各加生理鹽水0.5ml,作為不含血清的菌液對(duì)照。
7.取5種菌液充分搖勻,每種菌液加1排,血清zui終稀釋度分別為1:40、1:80、1:160直至1:2560。振蕩混合,置37C水浴16~20h后觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷:
先觀察液體部分清晰程度,然后輕輕搖動(dòng)試管,觀察管底有無凝塊浮起:
1.液體澄清、管底有凝塊、細(xì)菌*凝集者(100%凝集),為柵++++。
2.液體微混濁、管底有明顯凝塊、細(xì)菌大部分凝集者(75%凝集),為+++。
3.液體較混濁、管底有明顯凝塊、細(xì)菌中度凝集者(50%凝集),為++。
4.液體混濁、管底無凝塊、細(xì)菌輕度凝集者(25%凝集),為+。
5.液體混濁、無凝集現(xiàn)象,為陰性。
6.對(duì)照管均勻混濁無凝集現(xiàn)象。
7.被檢血清出現(xiàn)++凝集的zui高稀釋倍數(shù)為凝集效價(jià)。如第3管出現(xiàn)仲凝集,則判為1:160陽性;如各管均無凝集現(xiàn)象,則判為<l:40。
正常參考值:傷寒沙門H凝集效價(jià)1:80以下,傷寒沙門菌O凝集效價(jià)及各型副傷寒沙門H凝集效價(jià)均在1:40以下。
注意事項(xiàng):
1.過去曾預(yù)防接種傷寒、副傷寒疫苗者,H抗體效價(jià)明顯升高,并持續(xù)數(shù)年,而O抗體低于正常值。
2.以往患過傷寒病或曾接種傷寒疫苗,新近又感染流行感冒或布魯病,可產(chǎn)生價(jià)H抗體,O抗體則較低,但H抗體很快消失,此種反應(yīng)稱回憶反應(yīng)。
3.由于人們?cè)谌粘I钪锌赡馨l(fā)生隱感染而產(chǎn)生抗體,尤其在流行地區(qū)正常人的凝集效價(jià)可稍高,故在判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)考慮本地區(qū)正常人群的自然凝集效價(jià)水平作為參考。
4.沙門菌屬各菌種之間有某種共同抗原,在凝集試驗(yàn)中可能出現(xiàn)類屬交叉凝集反應(yīng),但效價(jià)較低。
5.陰性結(jié)果不能*排除傷寒的可能,應(yīng)注意有10%左右已確診為傷寒者在整個(gè)病程中抗體效價(jià)始終不升高。這可能與早期應(yīng)用抗生素、藥物抑制、免疫耐受和缺陷有關(guān)。
6.肥達(dá)反應(yīng)特異性不高,機(jī)體免疫功能紊亂、結(jié)核、敗血癥、病毒性肝炎及部分血吸蟲患者可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。
7.溶血、菌液過濃等均會(huì)影響結(jié)果。菌液過期或產(chǎn)生自凝者不宜使用。
肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)試劑(目錄)
抗傷寒桿菌H血清
抗傷寒桿菌O血清
傷寒桿菌H菌液
傷寒桿菌O菌液
甲型副傷寒桿菌菌液
乙型副傷寒桿菌菌液
丙型副傷寒桿菌菌液
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