蔗糖磷酸化酶檢測(cè)試劑盒

描述：測(cè)定意義
SP（EC2.4.1.7）主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化氫醌合成熊果苷，具有美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
蔗糖磷酸化酶檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào)：
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更新時(shí)間：2019-11-07
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產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題：蔗糖磷酸化酶檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

蔗糖磷酸化酶檢測(cè)試劑盒

測(cè)定原理

SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP⁺生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率，即可計(jì)算SP活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

緩沖液：液體40mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體2mL×1支，4℃保存。

試劑三：液體1mL×1支，4℃保存。

試劑四：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加5mL雙蒸水溶解。

試劑五：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加5mL雙蒸水溶解。

試劑六：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加10mL雙蒸水溶解。

試劑七：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加10mL雙蒸水溶解。

粗酶液提取

發(fā)酵液4℃，10000rpm，離心15min，取菌泥約0.5g，加入1mL提取液，用超聲波進(jìn)行破碎，功率為300w，破碎3s，間歇5s，總時(shí)間為3min，然后4℃，12000rpm，離心10min，取20μL測(cè)定蛋白含量，其余的作為待測(cè)樣本。

測(cè)定操作表

	對(duì)照管	測(cè)定管
緩沖液（μL）	850	650
試劑一（μL）	500	500
試劑二（μL）	30	30
試劑三（μL）	20	20
試劑四（μL）	100	100
試劑五（μL）	100	100
試劑六（μL）	200	200
試劑七（μL）	200	200
混勻，37℃水浴預(yù)熱5min
樣本（μL）		200
迅速混勻，于1mL石英比色皿，對(duì)照管調(diào)零，測(cè)定340nm的初始值A₁，測(cè)定完立即放入37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)2min，迅速測(cè)定340nm吸光值A₂，△A= A₂- A₁。