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描述:測定意義:AsA作為植物細胞一個重要生理指標,其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物體內(nèi),與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng),具有電子受體的作用。脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測試劑盒
標題:脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測試劑盒
測定原理:
DTT還原DHA生成AsA,通過測定體系中AsA的生成速率,即可計算出DHA含量。
自備儀器和用品:
低溫離心機、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
試劑二:液體40 mL×1瓶,室溫保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水充分溶解。
標準品:粉劑×1瓶, 4℃保存。臨用前加入5.743 mL蒸餾水充分溶解;吸取0.1 mL上述溶液,加入0.9 mL蒸餾水,混勻,即為100μmol/L DHA。
樣品中DHA提取:
稱取約0.1g樣品,加試劑一1 mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
DHA測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到265 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴鍋中預熱30 min以上。
3. 標準管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL標準液、160μL預熱的試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于265nm比色,記錄10s和130s的吸光值。
4. 測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL上清液、160μL預熱的試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于265nm比色,記錄10s和130s的吸光值。
脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測試劑盒
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