標(biāo)題：α-葡萄糖苷酶（α-GC）檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

α-葡萄糖苷酶(α-GC)檢測(cè)試劑盒

測(cè)定原理：

α-GC分解對(duì)-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-GC活性。

自備用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入10mL雙蒸水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。

試劑二：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每400萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），15000g，4℃，離心20min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、組織的處理：稱(chēng)取約0.2g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心20min，取上清，置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟和加樣表：

充分混勻，放入37℃準(zhǔn)確水浴30min后，立即放入沸水浴中煮沸5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻（以保證濃度不變）

充分混勻，8000g，4℃，離心5min，取上清液

充分混勻，室溫靜置2min后，用對(duì)照管調(diào)零，400nm處測(cè)定吸光值A

α-葡萄糖苷酶(α-GC)檢測(cè)試劑盒