P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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2×Taq PCR MasterMix *
產(chǎn)品簡介:
公司生產(chǎn)的 PCR MasterMix 包含三種酶(Taq,Pfu,Taq plus),每種酶對應(yīng)著兩種 PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六種 PCR MasterMix。 Taq:擴(kuò)增效率高的耐熱DNA聚合酶,其擴(kuò)增速度約為 1-2kb/min。擴(kuò)增堿基出錯(cuò)率為 10-5左右。其產(chǎn)物未端帶有A,可直接用于TA克隆。
Pfu:目前保真度高的耐熱DNA聚合酶,堿基出錯(cuò)率為 10-6,但擴(kuò)增效率低于Taq酶,一般能很好的擴(kuò)增 2kb以下的片段。其擴(kuò)增速度約為 500bp/min左右。其產(chǎn)物為平未端,須加A后才可用于TA克隆。
Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集擴(kuò)增效率高和保真度好于一身。擴(kuò)增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其擴(kuò)增速度約為 1000bp/min左右。其產(chǎn)物未端帶有A,可直接用于TA克隆。含染料PCR MasterMix反應(yīng)完后可以直接電泳檢測。
不含染料的PCR MasterMix反應(yīng)完后加入上樣緩沖液后電泳檢測。
產(chǎn)品組成(2×):
20 mM Tris-HCl (pH 8.3) 100 mM KCl 3mM MgCl2 500uM dNTP each 0.1U Polymerase/ul ddH2O 其它穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑
應(yīng)用舉例:
1、按下面配制 50ul PCR 反應(yīng)體系 Template <1ug Primer1(10uM) 2ul Primer2(10uM) 2ul 2×MasterMix 25ul ddH2O up to 50ul
2、PCR 反應(yīng)循環(huán)設(shè)置 94℃ 3min 94℃ 30sec 55℃ 30sec 30 cycles 72℃ 500-2000bp/1min 72℃ 5min
3、結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后,取 5ul 反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
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