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在生物樣本采集過程中,經(jīng)常需要前處理才可以用于我們后續(xù)的檢測,尤其是在采集全血的過程中,經(jīng)常需要用到抗凝劑,使采集靜脈血不發(fā)生凝固,常用的抗凝劑有哪些呢?
EDTA-乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽):是一種和鈉、二鉀或者三鉀組合制備抗凝劑的人工合成小分子,通過與任何形式的鈣絡合來防止血液凝結,進而通過抑制凝血反應來抑制纖維蛋白的產(chǎn)生。鉀鹽在血液中溶解性更好,三鉀的物理形態(tài)是液態(tài),二鉀可以通過噴霧干燥法使其附著在采血管表面,因而不會對采集的血樣產(chǎn)生稀釋效應。最佳濃度是每毫升血液含有1.5 mg EDTA。其產(chǎn)生的血樣會比用肝素抗凝的血樣在凍融后產(chǎn)生的凝血少。
肝素:是一種天然抗凝劑,由肥大細胞產(chǎn)生,它是一種高硫酸糖胺聚糖,在抗凝劑中最常使用鈉、鋰鹽,鉀和銨鹽也能用。在凝血反應中,它可以抑制酶原轉化,抑制纖維蛋白原纖維化,同時穩(wěn)定血小板來發(fā)揮作用。通常情況下肝素的濃度為每毫升血液20個單位,約每毫升血液0.2mg。其最大的缺點是貴,還有它只能延緩凝血過程而不能阻止凝血,加入肝素的全血常溫下8-12h就會開始逐漸凝結。
草酸鹽:和鈣離子絡合形成不溶性的化合物從而抑制凝血。銨、鋰、鉀、鈉等草酸鹽都可以作為抗凝劑使用,草酸鉀會使細胞溶膠從紅細胞排出,導致血漿被稀釋,為使稀釋效應最小化,其濃度一般為1-2mg/mL,高于此濃度會引發(fā)溶血,草酸銨可以使細胞膨脹,因此草酸銨與草酸鉀會以3:2比列混合使用。其可以改變血漿PH,還可以對磷酸酶有抑制作用,降低磷酸基團的水解程度,對一些藥物有穩(wěn)定作用。
檸檬酸鈉:螯合鈣離子形成可溶性的檸檬酸鈣達到凝血目的,其比草酸鹽更溶液引起溶血,導致血漿稀釋,通常使用3.2%或3.8%與全血1:9混合,可以改變?nèi)狿H值,對全血起到緩沖作用。
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